במקרה של הגדרה של אורך גל כפול, לאור החומרים המפריעים יש בדרך כלל פיזור אור וספיגת אור לא ספציפית, ולכן יש צורך להגדיר את אורך הגל ואת אורך המשנה הראשי, ואורך הגל העיקרי הוא שיא הקליטה האופייני של החומר שייבדק. העיקרון של קביעת אורך תת-גל הוא שהספיגה של חומרים מפריעים באורך הגל הראשי קרובה ככל האפשר לבליעה של אורך המשנה. אותו שיא ספיגה, כך שהוא יכול לחסל את ההפרעות של המוגלובין. לכן, ככל שאורך הגל הראשוני ואורך הגל המשני של המפריע קרובים יותר, כך ייטב.
דרישות מדידה
1. דגימה: סרום, שתן, נוזל מוחי וכו'.
2. ריאגנטים: מגיב יחיד, ריאגנט כפול
3. אורך גל כפול: שני אורכי גל המורכבים מאורך הגל הראשי ומתת-אורך הגל. ניתן לבטל הפרעות בתהליך הזיהוי.
4. כייל (סטנדרטי): השווה את הריכוז של דגימות לא ידועות
5. חומר בקרת איכות: משמש לניטור מצב מכשירים, ריאגנטים וכו' בעבודה היומיומית של המכשיר הביוכימי.
שיטה
1. שיטת נקודת הקצה (endessay) הופכת לחלוטין למוצרים, והתגובה אינה מתבצעת עוד כדי להגיע לנקודת הסיום, והספיגה של נקודת הקצה של התגובה נלקחת לחישוב ריכוז החומר הנבדק. בבדיקות ביוכימיות, למעט אנזימים, BUN ו-CRE, משתמשים בשיטות נקודת קצה לזיהוי.
1). שיטת נקודת סיום אחת: קח את הספיגה של נקודה כאשר התגובה מגיעה לנקודת הסיום כדי לחשב את התוצאה.
2). שיטת שתי נקודות קצה: קח את הספיגה של נקודה אחת לפני שהתגובה התחילה, ולאחר מכן קח את הספיגה של הנקודה השנייה כשהתגובה מגיעה לנקודת הסיום. חשב את התוצאה על ידי הפחתת הספיגה בנקודה השנייה פחות הספיגה בנקודה הראשונה. משמש בעיקר להפחתת ריאגנטים וחסר לדוגמא. להבטיח את דיוק התוצאות. משמש בדרך כלל עבור ריאגנטים כפולים.
2. שיטת זמן קבוע (שיטת שתי נקודות): זה לקחת את ההפרש בין שתי נקודות עדיין בתגובה כדי לחשב את התוצאה. שתי הנקודות הללו אינן נקודת ההתחלה ולא נקודת הסיום של התגובה. משמש בעיקר לאיתור פריטים לא ספציפיים, כגון קריאטינין.
3. שיטת ניטור מתמשך (שיטה קינטית, שיטת קצב): בעת מדידת פעילות האנזים או מטבוליטים של האנזים, נלקח באופן רציף ערך הספיגה (△; A/min) המשתנה באופן ליניארי בעקומת התגובה לחישוב התוצאה. זה נקרא גם תגובה מסדר אפס מכיוון שהפרש הספיגה בין הנקודות הוא אפס בזמן התגובה הליניארית.
